Ubiquityl-Histone H2A (Lys119) (D27C4) XP Rabbit mAb

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  • 品牌:CST
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商品名称:Ubiquityl-Histone H2A (Lys119) (D27C4) XP Rabbit mAb

  • 货号:8240S

支持性数据

反应性 H M R Mk
灵敏度 内源性
MW (kDa) 23
来源/同种型 兔 IgG

应用关键词:

  • WB- 蛋白质印迹法
  • IP-免疫沉淀法
  • IHC-免疫组织化学法
  • ChIP-染色质免疫沉淀法
  • C&R - CUT&RUN
  • C&T - CUT&Tag
  • DB - 点印迹
  • eCLIP - eCLIP
  • IF-免疫荧光法
  • F-流式细胞术

物种交叉反应性关键词:

  • H-人
  • M-小鼠
  • R-大鼠
  • Hm- 仓鼠
  • Mk-猴
  • Vir- 病毒
  • Mi-水貂
  • C-鸡
  • Dm-黑腹果蝇
  • X-爪蟾
  • Z-斑马鱼
  • B-牛
  • DG-犬
  • PG-猪
  • Sc-酿酒酵母
  • Ce-秀丽隐杆线虫
  • Hr-马
  • All-预期所有物种

产品使用信息

为了获得最佳的 ChIP 和 ChIP-seq 结果,每次免疫沉淀使用 5 μl 抗体和 10 μg 染色质(大约 4 x 106 个细胞)。该抗体已使用 SimpleChIP Enzymatic Chromatin IP Kits 进行了验证。

应用 稀释度
蛋白质印迹法 1:2000
免疫沉淀法 1:100
免疫荧光法(免疫细胞化学) 1:800 - 1:1600
流式细胞术(固定/通透) 1:800 - 1:3200
染色质免疫沉淀法 1:100
ChIP-seq 1:100

背景

核小体由四个核心组蛋白(H2A、H2B、H3 和 H4)组成,是染色质的主要组成部分。最初被认为可作为 DNA 包装的静态支架的组蛋白现在已被证明是动态蛋白,可进行多种类型的翻译后修饰,包括乙酰化、磷酸化、甲基化和泛素化 (1)。泛素是一种保守的 76 氨基酸肽单元,能通过泛素化过程共价连接多个细胞蛋白。这个蛋白-泛素接合过程涉及三种组分。泛素首先通过与激活组分 E1 形成硫酯复合体而被激活;激活的泛素继而转运到泛素载体蛋白 E2,然后从 E2 转运到泛素连接酶 E3,最后转运到靶标蛋白赖氨酸残基的 ε-NH2 (2)。组蛋白 H2A 在 Lys119 位点被多梳阻遏蛋白复合体 1 (PRC1) 单泛素化,它对发育性 HOX 基因的转录沉默和 X 染色体失活十分关键 (3-6)。PRC1 由 Bmi1 和 RING1A(又称 RING1 或 RNF1)组成,这两种组分能增强催化亚基 RING1B(又称 RING2 或 RNF2)的 E3 泛素连接酶活性 (3,4)。组蛋白 H2A 还在 DNA 损伤的 Lys119 位点被单泛素化。除了另一种 E3 泛素连接酶 RNF8,这种单泛素化活动需要 PRC1 组分 Bmi1 和 RING1B,并且通过结合 RAP80/UIMC1(包含 1 个蛋白的泛素互作基序)促进随后的 BRCA1 复合体募集 (7-10)。
  1. Peterson, C.L. and Laniel, M.A. (2004) Curr Biol 14, R546-51.
  2. Liu, F. and Walters, K.J. (2010) Trends Biochem Sci 35, 352-60.
  3. Wang, H. et al. (2004) Nature 431, 873-8.
  4. Cao, R. et al. (2005) Mol Cell 20, 845-54.
  5. de Napoles, M. et al. (2004) Dev Cell 7, 663-76.
  6. Fang, J. et al. (2004) J Biol Chem 279, 52812-5.
  7. Ginjala, V. et al. (2011) Mol Cell Biol 31, 1972-82.
  8. Bergink, S. et al. (2006) Genes Dev 20, 1343-52.
  9. Marteijn, J.A. et al. (2009) J Cell Biol 186, 835-47.
  10. Wu, J. et al. (2009) Mol Cell Biol 29, 849-60.
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