商品名称:EpiTect Bisulfite Kit (48)
完整的EpiTect离心和真空过程只需6小时,包括从DNA到待分析的亚硫酸氢盐转化后的高纯DNA。EpiTect 96 Bisulfite操作时间少于7小时。传统的亚硫酸氢盐转化过程需要18个小时,且需要大量的操作(参见" 快速简单的亚硫酸氢盐转化"和" Time saving procedure")。EpiTect Bisulfite Kit为成功进行亚硫酸氢盐转化和DNA回收提供所需的全部试剂。
EpiTect流程 | 传统流程 | |
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反应构建 | 10分钟;预制溶液 | 40分钟;需反应构建 |
亚硫酸氢盐转化 | 5小时 | 16小时 |
纯化 | 30–45分钟; EpiTect离心柱或孔板 | 120分钟;纯化、脱璜、沉淀和洗涤 |
每个EpiTect Bisulfite Kit可以相同的效率转化低至1 ng到2 µg DNA。全新的实验步骤和优化的缓冲液可回收得到高产量的转化DNA。当通过real-time PCR扩增经转化的DNA时,低CT值的实验结果显示了高效的胞嘧啶转化(参见"Complete cytosine conversion.
从珍稀样本和少量样本(如:福尔马林固定、FFPE石蜡包埋或显微切割组织)中确定甲基化模式,由于DNA的量很少,实验尤其困难。但是这些样本类型是成功鉴定有价值的疾病,预测生物标记物的专门研究对象。 EpiTect Bisulfite Kit 为这些类型的样本提供优化的操作流程,从而解决了难题(参见" Methylation detection from FFPE tissue samples")。该试剂盒含有实验所需的全部缓冲液和试剂,只需少量的手动操作。
对于从FFPE样本、细胞、血液及组织中直接进行亚硫酸氢盐转化而无需预先分离DNA,我们推荐使用EpiTect Plus FFPE Bisulfite Kit和EpiTect Plus LyseAll Bisulfite Kit。
DNA保护缓冲液采用独特的配方,防止DNA过度降解(在高温、低pH值条件下使用亚硫酸氢盐处理DNA时经常出现严重的DNA降解),并实现有效的DNA变性,从而产生完全转化为胞嘧啶时所需的单链DNA(参见" Unique DNA Protect Buffer and pH indicator system")。防止DNA降解的发生可以保证后续大PCR片段的扩增和分析(参见" Fast and easy bisulfite conversion")。DNA保护缓冲液含有PH指示剂染料,从而可保证用于胞嘧啶转化的正确的pH条件。有效的完整DNA回收可保证转化后的DNA至少保存12个月而不影响DNA的质量(参见" Long-term DNA storage")。