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商品名称：SimpleChIP Human LENG8 5' UTR Primers

货号：70823S

支持性数据

反应性
灵敏度
MW (kDa)
来源/同种型	山羊

应用关键词：

WB- 蛋白质印迹法
IP-免疫沉淀法
IHC-免疫组织化学法
ChIP-染色质免疫沉淀法
C&R - CUT&RUN
C&T - CUT&Tag
DB - 点印迹
eCLIP - eCLIP
IF-免疫荧光法
F-流式细胞术

物种交叉反应性关键词：

H-人
M-小鼠
R-大鼠
Hm- 仓鼠
Mk-猴
Vir- 病毒
Mi-水貂
C-鸡
Dm-黑腹果蝇
X-爪蟾
Z-斑马鱼
B-牛
DG-犬
PG-猪
Sc-酿酒酵母
Ce-秀丽隐杆线虫
Hr-马
All-预期所有物种

产品说明

经亲和纯化的 goat anti-rat IgG（重链和轻链）抗体接合辣根过氧化物酶 (HRP)，可进行化学发光检测。该产品已全面使用 CST 一抗进行验证，非常适用于 CST 蛋白质免疫印迹实验步骤，从而确保获得准确和可重现的结果。

产品说明

产品使用信息

推荐的抗体稀释度：

1:10001:3000

20X LumiGLO Reagent and 20X Peroxide #7003 1:1K1:3K

SignalFireTM ECL Reagent #6883 1:1K1:3K

SignalFireTM Plus ECL Reagent #12630 1:5K-1:15K

SignalFireTM Elite ECL Reagent #12757 1:10K-1:20K

保存

保存在 10mM HEPES 钠 (pH 为 7.5)，150 mM NaCl、 2 mg/ml 牛血清白蛋白 (BSA)， 50% 甘油中。-20℃ 保存。切勿分装抗体。该产品在 -20C 下可稳定保存 60 个月。

实验步骤

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蛋白质印迹法实验步骤

蛋白质印迹法就是将膜与 5% w/v 脱脂奶粉、1X TBS 以及 0.1% Tween 20 中的稀释的一抗在 4°C 下进行夜间孵育，同时轻轻晃动。

注意：请参阅一抗产品网页了解推荐的抗体稀释度。

A. 溶液与试剂

注：使用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水配制溶液。

20X 磷酸盐缓冲生理盐水 (PBS)：(#9808) 若要制备 1 L 1X PBS：将 50 ml 20X PBS 添加至 950 ml dH₂O，混合。
10 X Tris 缓冲盐水 (TBS)：(#12498) 若要配制 1 L 1X TBS：将 100 ml 10X 添加至 900 ml dH₂O ，混合。
1X SDS 样品缓冲液：Blue Loading Pack (#7722) 或 Red Loading Pack (#7723) 通过将 1/10 体积的 30X DTT 添加至 1 体积的 3X SDS 样品缓冲液，配制新鲜的 3X 还原性上样缓冲液。用 dH₂O 稀释至 1X。
10X Tris-Glycine SDS 电泳缓冲液：(#4050) 若要配制 1 L 1X 电泳缓冲液：将100 ml 10X 电泳缓冲液添加至 900 ml dH₂O ，混合。
10X Tris-Glycine 转移缓冲液：(#12539) 要制备 1 L 1X 转移缓冲液：将 100 ml 10X 转移缓冲液添加至 200 ml 甲醇 + 700 ml dH₂O 中，并混合。
含有 Tween 20 (TBST) 的 10 X Tris 盐缓冲液：(#9997) 要制备 1 L 1X TBST：将 100 ml 10X TBST 添加至 900 ml dH₂O 中并混合。
脱脂奶粉：(#9999)。
封闭缓冲液：含 5% w/v 脱脂奶粉的 1X TBST；要制备 150 ml，将 7.5 g 脱脂奶粉添加至 150 ml 1X TBST 中并充分混匀。
洗涤缓冲液：(#9997) 1X TBST。
一抗稀释缓冲液：含 5% 脱脂奶粉的 1X TBST；要制备 20 ml，将 1.0 g 脱脂奶粉添加至 20 ml 1X TBST 中并充分混匀。
Biotinylated Protein Ladder Detection Pack：(#7727)。
Blue Prestained Protein Marker, Broad Range (11-250 kDa)： (#59329)。
印迹膜：(#12369) 本实验步骤针对硝酸纤维素膜进行了优化。通常推荐 0.2 m 孔径。
HRP 偶联二抗：Anti-rat IgG, HRP-linked Antibody (#7077)。
检测试剂：SignalFire ECL Reagent (#6883)。

B. 蛋白质印迹

制备样品的常规流程。

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