商品名称:QuantiTect Whole Transcriptome Kit (100)
QuantiTect Whole Transcriptome Kit对有限的RNA样品进行预扩增和逆转录,获得高产量cDNA,用于无限次real-time PCR基因表达分析。该试剂盒包含全转录扩增所需的全部酶和缓冲液。对Phi29聚合酶创新的修饰确保从低至1 ng RNA中制备多至40 μg cDNA。该聚合酶独特的加工过程可制备高度统一的cDNA,确保通过real-time PCR进行可靠的基因表达分析。
QuantiTect Whole Transcriptome Kit确保所有转录子高度一致的扩增,这对于基因表达分析是必需的。所有mRNA转录子以相同的形式同时在5'和3'末端扩增(参见"Equal amplification of 5' and 3' regions.
可获得多至40 μg的可重复、高产量的cDNA(参见" Reproducible cDNA yields")。能够进行无限次real-time PCR分析,并具有高度重复性的CT值(参见" Reliable real-time PCR analysis")。此外,由于cDNA比RNA更稳定,可以存档用于以后的研究工作。
起始材料 | 扩增时间 | 扩增产物的常规产量 | 可进行的real-time PCR次数* |
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10 ng RNA | 2小时 | 至多10 µg cDNA | 1000 |
10 ng RNA | 8小时 | 至多40 µg cDNA | 4000 |
获得的生物样本量太少可能限制基因表达谱分析。使用QuantiTect Whole Transcriptome Kit可对少量珍贵的样品进行无限次real-time PCR分析。QuantiTect Whole Transcriptome Kit经优化,用于1 ng RNA或相当于约50个细胞RNA的全转录扩增,甚至可以用更少量的RNA,这些取决于RNA的品质和转录子的丰度。
QuantiTect Whole Transcriptome Kit含有逆转录酶、DNA聚合酶和优化的缓冲液及试剂,可对一个RNA样本的所有转录本进行扩增。此试剂盒整合了经质量验证的REPLI-g技术,通过非偏向序列扩增来合成cDNA。REPLI-g扩增采用Multiple Displacement Amplification(MDA)技术,应用独特加工的DNA聚合酶实现等温扩增(参见" Whole transcriptome amplification")。该技术确保包括5’末端在内的所有转录区的同等扩增,从而获得可用于real-time PCR的足够多的cDNA。