所有qBiomarker Copy Number PCR Assays都设计在基因组的独特区域。每个芯片都含有一个多拷贝参照分析,即qBiomarker Multicopy Reference Copy Number PCR Assay (MRef)。参照分析检测人体基因组中出现超过40次的稳定序列,其拷贝数不会受自身基因组变化影响或影响很小。检测包含参照分析可运用ΔΔCT法对特定靶标进行准确的拷贝数分析或相对拷贝数变化分析。一体化、即用型qBiomarker SYBR® Green PCR Mastermixes经优化,可提供最大化的位点特异性扩增并产生较少引物二聚体。
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Procedure
从新鲜、冷冻或福尔马林固定石蜡包埋(FFPE)样本中分离基因组DNA。将每个样本与合适的即用型qBiomarker SYBR Green Mastermix和qBiomarker Copy Number PCR Assay混合。在另一管中,将每个样本与预混液和qBiomarker Multicopy Reference Copy Number PCR Assay混合。在real-time PCR仪上运行,使用免费的数据分析工具将检测样本与参照基因组对比,通过ΔΔCT法确定拷贝数变化。
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Applications
qBiomarker Copy Number PCR Assays非常适合准确检测新鲜、冷冻或福尔马林固定石蜡包埋(FFPE)样本的单个位点的拷贝数改变或变化。