His Strep pQE-TriSystem Vector Set

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  • 品牌:Qiagen/凯杰
  • 货号:32942
  • 规格:1kit
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    吉林省

    黑龙江省

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看了又看换一换

商品名称:His Strep pQE-TriSystem Vector Set

  • 货号:32942
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Features

  • 单个载体在三个体系中平行表达
  • 无需进行费时的亚克隆步骤
  • 高水平表达
  • 严谨的表达调控
  • 提高了毒性蛋白表达的稳定性
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Product Details

His-Strep pQE-TriSystem Vector Set中的载体含有E. coli、昆虫细胞和哺乳动物细胞表达系统的启动子。His-Strep pQE-TriSystem载体含有一个6xHis和一个Strep标签,可在Ni-NTA和Strep-Tactin基质上进行连续纯化,获得超纯(纯度>98%)蛋白。载体C端都含有一个标签,确保纯化全长蛋白。
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Performance

His-Strep pQE-TriSystem Vector Set表达的双标签蛋白可通过两步亲和纯化进行分离,获得超纯(纯度>98%)蛋白(参见 Ultrapure protein in two steps)。
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Principle

His-Strep pQE-TriSystem Vector Set可表达同时带有一个6xHis和一个Strep-tag II标签的蛋白。双标签蛋白经两步亲和纯化系统纯化,通过标准化流程简单、高效纯化超纯蛋白。此系统无需研发和优化蛋白特异性操作流程,可提高通量。带有两种标签的重组蛋白可在Ni-NTA和Strep-Tactin基质上进行连续纯化(参见"Two-step affinity procedure")。两个简单的亲和纯化步骤可获得完全有活性、全长、超纯的蛋白,适用于多种下游应用。
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Procedure

使用pQE-TriSystem His-Strep载体在E. coli、昆虫细胞或哺乳动物细胞中可有效表达带有两个小亲和标签(6xHis和Strep-tag II标签)的重组蛋白。细胞裂解并澄清裂解液后,首先通过固定化金属亲和层析(IMAC)操作流程纯化蛋白,此流程基于经验证的6xHis-tag-Ni-NTA相互作用。使用咪唑从Ni-NTA基质洗脱后,重组蛋白(也带有Strep-tag II标签)直接加入到Strep-Tactin基质中(参见"Two-step affinity purification procedure")。无需改变缓冲液。使用生物素或脱硫生物素可从Strep-Tactin基质中洗脱蛋白。使用Strep-tag或Anti·His的小鼠单抗可高特异性和灵敏度地检测蛋白(参见" Highly sensitive detection of proteins carrying a Strep-tag")。

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Applications

Two-Step Affinity Purification System非常适合需要高纯度但单独的His标签纯化难以达到的应用,如真核细胞的蛋白表达。Two-Step Affinity Purification System具有的超高纯度和便利性使其适用于:
  • 高纯度蛋白纯化
  • 结构和功能分析
  • 真核系统表达
     
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销售区域
  • 辽宁省
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