商品名称:QIAexpress Type IV Kit
QIAexpress pQE 载体将强效的噬菌体 T5 启动子(可被 E. coli RNA 聚合酶识别)与双 lac 操作子抑制模块相结合,以在 E. coli 中提供严格调控的高水平重组蛋白表达。在存在高水平 lac 阻遏物的情况下,蛋白质合成被有效阻断,并且细胞毒性构建体的稳定性得以增强。pQE 载体(参见图片 pQE 载体和表格)能够将 His 标签置入重组蛋白的 N-末端或 C-末端。
元件 | 说明 |
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1.优化的启动子/操作子元件 | 由噬菌体 T5 启动子和两个 lac 操作子序列组成,这增加了 lac 阻遏物结合的可能性,并确保强效 T5 启动子的有效抑制 |
2.合成核糖体结合位点 RBSII | 用于高效翻译 |
3.His 标签编码序列 | 5' 或 3' 到多位点人工接头克隆区 |
4.翻译终止密码子 | 在所有阅读框架中,用于方便地制备表达构建体 |
5.两个强转录终止子 | t0 来自噬菌体 λ,T1 来自 E. coli 的 rrnB 操纵子,以阻止连读转录并确保表达构建体的稳定性 |
6.ColE1 复制起点 | 来自 pBR322 |
7. β-内酰胺酶基因 (bla) | 赋予氨苄青霉素耐药性 |
将编码目标蛋白质的插入片段克隆到合适的构建体中,并转化至合适的 E. coli 菌株中进行表达。通过添加 IPTG 来诱导表达。QIAexpress Type IV Kit 构建体可以转化至 E. coli 中,用作昆虫细胞中重组蛋白表达的穿梭载体,或转染至哺乳动物细胞中。
QIAexpress Expression System 提供适用于许多应用的蛋白质高水平表达,包括: