QIAexpress Type IV Kit

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  • 10950
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  • 10950

  • 品牌:Qiagen/凯杰
  • 货号:32149
  • 规格:1kit
  • 计量单位:
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  • 辽宁省

    吉林省

    黑龙江省

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看了又看换一换

商品名称:QIAexpress Type IV Kit

  • 货号:32149
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Features

  • 覆盖所有三个阅读框的载体
  • 用于 His 标签蛋白表达和纯化的完整试剂盒
  • N-末端 His 标签蛋白的高水平表达
  • 用于一步法纯化和灵敏性检测的通用型、完整系统
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Product Details

QIAexpress System 提供了用于 His 标签蛋白表达、纯化和检测的材料。
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Performance

QIAexpress Type IV Kit 提供高达总细胞蛋白 50% 的高效表达。
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Principle

QIAexpress pQE 载体将强效的噬菌体 T5 启动子(可被 E. coli RNA 聚合酶识别)与双 lac 操作子抑制模块相结合,以在 E. coli 中提供严格调控的高水平重组蛋白表达。在存在高水平 lac 阻遏物的情况下,蛋白质合成被有效阻断,并且细胞毒性构建体的稳定性得以增强。pQE 载体(参见图片  pQE 载体和表格)能够将 His 标签置入重组蛋白的 N-末端或 C-末端。

QIAexpress pQE 载体中存在的元件
元件 说明
1.优化的启动子/操作子元件 由噬菌体 T5 启动子和两个 lac 操作子序列组成,这增加了 lac 阻遏物结合的可能性,并确保强效 T5 启动子的有效抑制
2.合成核糖体结合位点 RBSII  用于高效翻译
3.His 标签编码序列 5' 或 3' 到多位点人工接头克隆区
4.翻译终止密码子 在所有阅读框架中,用于方便地制备表达构建体
5.两个强转录终止子 t0 来自噬菌体 λ,T1 来自 E. coli 的 rrnB 操纵子,以阻止连读转录并确保表达构建体的稳定性
6.ColE1 复制起点 来自 pBR322
7. β-内酰胺酶基因 (bla) 赋予氨苄青霉素耐药性
See figures
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Procedure

将编码目标蛋白质的插入片段克隆到合适的构建体中,并转化至合适的 E. coli 菌株中进行表达。通过添加 IPTG 来诱导表达。QIAexpress Type IV Kit 构建体可以转化至 E. coli 中,用作昆虫细胞中重组蛋白表达的穿梭载体,或转染至哺乳动物细胞中。

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Applications

QIAexpress Expression System 提供适用于许多应用的蛋白质高水平表达,包括:

  • 功能性构象活性蛋白质的纯化
  • 在变性条件下进行纯化用于抗体生产
  • 结晶用于三维结构测定
  • 涉及蛋白质-蛋白质和蛋白质-DNA 相互作用的检测
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