商品名称:EpiTect Whole Bisulfitome Kit (25)
EpiTect Whole Bisulfitome Kit包含DNA聚合酶、缓冲液和试剂,采用多重置换扩增(MDA)技术,用于经亚硫酸氢盐转化后DNA的全基因组扩增。EpiTect Whole Bisulfitome Kit使用经验证的REPLI-g技术,专为扩增经亚硫酸氢盐转化DNA研发(亚硫酸氢盐转化后其核苷酸组成已发生改变,且DNA片段更小),同时维持转化后序列。EpiTect Whole Bisulfitome Kit的常规DNA产量是每次反应1–3 μg,因此,单次亚硫酸氢盐反应获得的模板DNA可进行多达300次PCR分析。
基因组DNA序列的甲基化分析正面临着挑战,尤其在样本量较少的情况下。使用EpiTect Whole Bisulfitome Kit可高度一致的扩增亚硫酸氢盐转化后DNA的全基因组,无序列偏向性(参见" EpiTYPER MALDI-TOF analysis of WBA DNA")。该方法基于等温多重置换扩增(MDA)技术。复制过程中通过带有3'→5'外切酶校正活性的行进性DNA聚合酶确保其高保真扩增。
EpiTect Whole Bisulfitome Kit应用经验证的REPLI-g技术,专为扩增经亚硫酸氢盐转化后DNA研发(亚硫酸氢盐转化后其核苷酸组成已发生改变,且DNA片段更小),同时维持转化后序列的表现。配合含有独特DNA保护体系的EpiTect Bisulfite Kits,可获得最佳结果。这样可确保DNA有效变性,生成胞嘧啶完全转化所必需的单链DNA,同时避免由于高温、低pH值的亚硫酸氢盐处理引起的DNA过度断裂。通过预防DNA断裂可确保后续较长DNA片段的扩增。使用EpiTect Whole Bisulfitome Kit,通常每个反应获得的DNA的量为1–3 μg。
方便的一步反应体系,即使用反应缓冲液和REPLI-g DNA聚合酶的混合液孵育亚硫酸氢盐转化后的模板DNA。加热失活聚合酶后,扩增的DNA可直接进行分析或贮存(参见" WBA procedure")。
生物学和医药研究的很多领域中,尤其是肿瘤学、干细胞研究和发育生物学研究中,获得表观遗传学信息是首要任务。但是,由于缺乏提供可重复性数据的标准化方法,尤其是样本材料的限制,分析DNA的甲基化变化非常困难。QIAGEN最新推出的EpiTect方案,建立了从DNA样本收集、稳定和纯化到亚硫酸氢盐转化和real-time或终点式PCR甲基化分析或测序的标准化预分析和分析方案(参见" Standardized workflows in epigenetics")。