商品名称:QIAamp DSP DNA Blood Mini Kit (50), CE
QIAamp DSP DNA Blood Mini Kit采用硅胶模技术纯化DNA,适用于进行血液DNA纯化的实验室。
使用QIAamp DSP DNA Blood Mini Kit纯化的基因组DNA可即用于基于酶扩增或其他修饰的各种下游应用,如PCR。
全血样品使用装有抗凝剂(EDTA或柠檬酸盐)的不同类型的管子收集,包括:BD Vacutainer、Monovette和Vacuette管(参见下表)。血液样品可反复冻融至少3次,仍可用于DNA纯化(参见" DNA from frozen and thawed blood")。
管子 | 生产商 | 编号 | 体积 | 200 µl的平均产量 |
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BD Vacutainer 9NC | BD | 366007 | 9 ml | 6.4 µg |
BD Vacutainer K3E | BD | 368457 | 10 ml | 6.6 µg |
BD Vacutainer K2E | BD | 367864 | 6 ml | 6.4 µg |
S-Monovette EDTA | Sarstedt | 02.1066.001 | 9 ml | 6.5 µg |
S-Monovette CPDA1 | Sarstedt | 01.1610.001 | 8.5 ml | 6.3 µg |
Vacuette K3E | Greiner Bio-One | 455036 | 9 ml | 6.5 µg |
Vacuette 9NC | Greiner Bio-One | 454382 | 2 ml | 6.3 µg |
QIAamp DSP DNA Blood Mini Kit采用成熟的QIAamp技术纯化基因组DNA。QIAamp硅胶膜特异性结合裂解样品中的DNA,其他裂解物通过离心或真空操作去除。经过有效地洗涤去除污染物,然后洗脱DNA,洗脱体积为50–200 µl。
有两个可供选择的流程用于从血液中纯化基因组DNA,使用离心机或使用真空抽滤装置和离心机(参见" Procedure")。
含有EDTA或柠檬酸盐的血液样品(200 µl)用含QIAGEN Protease的裂解缓冲液56℃裂解10分钟。乙醇加入到裂解物中,使DNA特异性结合到QIAamp硅胶膜上。裂解物上样到QIAamp Mini离心柱,离心或真空处理。DNA特异性结合到QIAamp硅胶膜上,污染物流走。结合的DNA使用两种不同的缓冲液有效洗涤,离心干缩QIAamp硅胶膜。洗脱缓冲液(50–200 µl)上样到QIAamp硅胶膜,1分钟后离心洗脱纯的DNA。
QIAamp DSP DNA Blood Mini Kit使用经验证的QIAamp技术从新鲜或冷冻的全血中纯化DNA,其中血液是使用柠檬酸盐或EDTA处理过的。