商品名称:Strep-TactinSuperflow Plus (10 ml)
Strep-Tactin Superflow Plus可高效纯化蛋白(参见" Efficient purification of Strep-tagged GFP with Strep-Tactin Superflow Plus"和" Highly specific detection of Strep-tagged proteins in any expression system")。
同时,可用pQE TriSystem His·Strep TriSystem Vectors表达带有His-和Strep-tag双标签的蛋白,进行两步纯化操作流程。串联的Ni-NTA和Strep-Tactin纯化步骤标准化且十分快速,可获得超纯度蛋白。
Strep-tagged蛋白能高亲和力和特异性地结合到由链亲和素工程改造的Strep-Tactin上。漂洗过后,蛋白可由低浓度的生物素(链亲和素的天然配体)或脱硫生物素(稳定、可逆结合的生物素类似物)洗脱下来(参见" Binding of Strep-tagged proteins to Strep-Tactin and elution using desthiobiotin")。可在原核和真核体系中高效、标准地纯化带有小的Strep-tag II标签蛋白,得到高纯度蛋白。另外,当其他标签可能不适用时,可选用Strep-Tag II体系,例如EDTA等缓冲液添加剂会IMAC柱金属离子脱落。
基质 | 蛋白结合能力 |
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Strep-Tactin Superflow Plus | 多至9 mg/ml |
Strep-Tactin Superflow | 多至3 mg/ml (~150 nmol@ 20 kDa) |
Strep-Tactin Magnetic Beads | 200-300 μg/ml (10%悬浮液) (~10-15 nmol @ 20 kDa) |
使用pQE TriSystem Vector表达Strep-tagged蛋白,采用Strep-Tactin Superflow Plus亲和纯化操作流程从细胞裂解液中得到高纯度蛋白。可使用批量或重力流方法纯化Strep-tagged蛋白,或在FPLC兼容柱中装入Strep-Tactin Superflow Plus,可在液相色谱层析系统上纯化。Strep-Tactin Superflow Plus有1 ml和5 ml预装柱两种规格,可在液相色谱层析系统上自动纯化,如FPLC、ÄkTA和BioLogic体系,或使用注射器进行手动纯化。与Strep-Tactin树脂兼容的试剂,参见与Strep-tag Strep-Tactin相互作用兼容的试剂。
非离子去垢剂 | 离子和两性离子去垢剂 | 还原剂 | 其他 | 盐 |
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2% Triton X-100 | 2% N-lauryl sarcosine | 50 mM DTT | 25% glycerol | 5 M sodium chloride |
2% Tween 20 | 0.1% SDS | 2 M ammonium chloride | ||
2% N-octyl-β-D-glucopyranoside | 1.3% N-octyl-2-hydroxy-ethylsulfoxide | 1 M calcium chloride | ||
0.2% N-nonyl-β-D-glucopyranoside | 0.3% CHAPS | |||
2% Igepol CA-630 (Nonidet P40) | 0.1% N-dodecyl-N,N-dimethylamine-N-oxide | 1 M guanidine | ||
0.12% C10E5; decylpentaoxyethylene | 0.034% DDAO;N-decyl-N,N-dimethylamine-N-oxide | 1 mM phenylmethyl-sulfonyl fluoride (PMSF) | ||
0.03% C10 E6 | 10% ethanol | |||
0.005% C12 E8 | ||||
0.023% C12E9; dodecyl nonooxyethylene (Thesit) | ||||
0.35% DM; decyl-β-D-maltoside | ||||
0.007% LM; N-dodecyl-β-D-maltoside |
标签位于C端可确保只有全长蛋白被纯化。纯化操作流程具有高度可重复性,确保每次制备都得到同样高品质蛋白。在免疫检测步骤中,可用Strep-tag抗体对Strep-tagged蛋白进行高灵敏度和特异性的检测。
Strep-Tactin Superflow Plus可用于高效、可重复地纯化至多9 mg Strep-tagged蛋白/ml树脂。纯化得到的蛋白可用于: