蛋白-解决方案:【Western Blot研究】

Western Blot整体解决方案

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Western Blot是一种非常经典的定性、定量检测蛋白表达的方法。其原理通俗来说:采用聚丙烯酰胺凝胶电泳,蛋白质是被检测物,“探针”是抗体,“显色”用标记的二抗。经过PAGE分离的蛋白质样品,转移到固相载体(例如PVDF薄膜)上,固相载体以非共价键形式吸附蛋白质,且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原,与对应的抗体起免疫反应,再与酶或同位素标记的第二抗体起反应,经过底物显色或放射自显影以检测电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白成分。


1、样本制备--蛋白抽提


总蛋白/可溶蛋白抽提

目录号

产品描述

用途

产品特点

71456

BugBuster®master Mix

细菌裂解,可溶活性蛋白抽提,重组表达蛋白抽提

BugBuster系列采用专利的表面活性剂配方,用于高效抽提细菌活性可溶蛋白以及高纯度包涵体,无需剧烈的弗氏压榨或超声等,10-20分钟常温孵育即可。产品形式多样,满足各种优化需求。
master Mix中含有的Benzonase核酸酶以降低样品粘度,溶菌酶提高抽提产量,是最为高效和方便的形式。
10×浓缩液形式中没有加入盐和缓冲液,方便根据需要自行加入缓冲液。
提供大包装及中文操作说明书。

70584

BugBuster®Protein Extraction Reagent

B7435

CelLytic™ B Cell Lysis Reagent

zwitterionic非变性表面活性剂配方,较超声和溶菌酶抽提产量更高,提供多种产品形式满足不同要求。B7310和C8740分别为2×和10×浓缩液(还可用于酵母和哺乳动物细胞抽提),提供多种不同包装形式

R0278

RIPA Buffer 

哺乳动物细胞蛋白抽提

温和配方,减少蛋白非特性结合,产物适用于IP、pulldown和WB

20-188

RIPA Lysis Buffer, 10X

温和配方,10×浓缩形式,性价比高,产物适用于IP和WB

C2978

CelLytic™ M 

 比冻融和超声法抽提产量提高50%以上,产物适用于报告基因分析、IP、WB、EMSA、激酶分析、磷酸酶分析等

71009

CytoBuster™ Protein Extraction Reagent 

哺乳动物/昆虫细胞蛋白抽提

温和的非离子型表面活性剂专利配方,高效抽提可溶活性蛋白,无需冻融和超声处理,抽提产物可用于免疫沉淀和激酶分析等;提供中文操作说明书

C3228

CelLytic™ MT Cell Lysis Reagent

哺乳动物组织蛋白抽提

温和非变性即用型配方,20 mL用于1g组织裂解抽提


裂解/抽提优化产

目录号

产品描述

用途

产品特点

E1014

Benzonase®Nuclease 

高效、广谱降解各种形式的DNA和RNA,降低样品粘度,提高蛋白产量

纯度≥90%,浓度≥250 units/μL

70746

Benzonase®Nuclease, Purity > 90%

纯度≥90%,常规浓度25-29U/µl,HC级别的浓度为250 U/μL,提供中文说明书

71205

Benzonase®Nuclease HC, Purity > 90%

70664

Benzonase®Nuclease, Purity > 99%

纯度≥99%, 常规浓度25-29U/µl,HC级别的浓度为250 U/μL内毒素< 0.25 EU/1000U,提供中文说明书

71206

Benzonase®Nuclease HC, Purity > 99%

62970

Lysozyme from chicken egg white 

消化细菌细胞壁,原生质体制备

溶菌酶干粉

L6876

Lysozyme from chicken egg white 

溶菌酶干粉,≥90%, ≥40,000 units/mg protein 

L2524

Lyticase from Arthrobacter luteus

消化真菌细胞壁,酵母原生质体制备

溶壁酶干粉,≥2,000 units/mg protein

475855

Miracloth

匀浆过滤,原生质体制备

神奇滤布,是一种孔径为22-25 μm的聚酯人造纤维滤布,用于分离原生质体、细胞匀浆过滤、核酸纯化等。18 in. x 50 ft.

539180

ProteoExtract®Protein Precipitation Kit

蛋白沉淀

快速浓缩蛋白、去除杂质,产物得率>90%,可用于IEF,1D/2DEG及质谱分析等


蛋白定量试剂盒

目录号

产品描述

71285-3CN

BCA Protein Assay Kit

BCA1

Bicinchoninic Acid Kit for Protein Determination

B6916

Bradford Reagent for 0.1-1.4 mg/ml protein


蛋白/大分子脱盐、浓缩、缓冲液置换

目录号

产品描述

截留分子量

UFC5003BK

Amicon Ultra 0.5mL

3kDa

UFC500396

Amicon Ultra 0.5mL

3kDa

UFC5010BK

Amicon Ultra 0.5mL

10kDa

UFC501096

Amicon Ultra 0.5mL

10kDa

UFC5030BK

Amicon Ultra 0.5mL

30kDa

UFC503096

Amicon Ultra 0.5mL

30kDa

UFC5050BK

Amicon Ultra 0.5mL

50kDa

UFC505096

Amicon Ultra 0.5mL

50kDa

UFC5100BK

Amicon Ultra 0.5mL

100kDa

UFC510096

Amicon Ultra 0.5mL

100kDa

UFC800396

Amicon Ultra 4mL

3kDa

UFC801096

Amicon Ultra 4mL

10kDa

UFC803096

Amicon Ultra 4mL

30kDa

UFC805096

Amicon Ultra 4mL

50kDa

UFC810096

Amicon Ultra 4mL

100kDa

UFC900396

Amicon Ultra 15mL

3kDa

UFC901096

Amicon Ultra 15mL

10kDa

UFC903096

Amicon Ultra 15mL

30kDa

UFC905096

Amicon Ultra 15mL

50kDa

UFC910096

Amicon Ultra 15mL

100kDa


2、电泳


预制胶:

目录号

产品描述

产品形式/包装规格

优势和特点

PCG2003

TruPAGE precast gels 4-12%, 10 x 10cm, 12-well 

2块,10块

• 保质期长:2~8℃ 条件下可稳定保存2年
• 更加强韧:比标准预制胶强韧10倍,有效防止断裂
• 方便快捷:电泳时间仅30分钟,即用即插,无需移除梳子、封条等步骤
• 可重复性强:确保批次实验结果的稳定性,省钱、省时、省力

PCG2010

TruPAGE precast gels 12%, 10 x 8cm, 12-well

2块,10块

PCG2011

TruPAGE precast gels 4-12%, 10 x 8cm, 12-well

2块,10块

PCG2012

TruPAGE precast gels 4-20%, 10 x 8cm, 12-well

2块,10块

PCG2015

TruPAGE precast gels 4-12%, 10 x 8cm, 17-well

2块,10块

P5472

 precast gels 1.0% 8-well (portrait orientation) 

20块


蛋白Marker

目录号

产品描述

优势和特点

C1992

ColorBurst™ Electrophoresis Marker (M.W. 8,000–220,000) 

• ColorBurst 蛋白分子量标准色彩明亮、解析度上佳、方便、稳定,可在各种不同胶组成和浓度下取得出色的检测效果。
• ColorBurst包括8种被化学还原、烷基化、用鲜艳的彩色染料标记的8到220kDa蛋白质。
• ColorBurst可以用来估算样品分子量、监测电泳进度,或者用来确认电转染是否完成。

C6210

Color Marker Ultra-low Range (M.W. 1,060-26,600) 

• Sigma显色蛋白分子量标准含有5-6种显色染料标记的蛋白,能用来监测蛋白质电泳迁移和电转效果。
• 低分子量范围可以用于Laemmli SDS-PAGE系统。
• 超低分子量范围可以用于Tricine SDS-PAGE 系统。

M3546

Ultra-low Range Molecular Weight Marker (M.W. 1,060-26,600) 


V900915

Vetec™ reagent grade, low range, mol wt 12,000-80,000 Da


 

WIX电泳系列:

 

     

 

WIX垂直电泳槽质保五年,配件通用性价比高可容纳1-4块手灌胶或预制胶,1小时内完成多达4块小型凝胶电泳;灌胶框底部独有超平玻璃支撑,有效避免了玻璃板滑落及试验台不平致使玻璃板错位问题;)电泳芯边卡滑动楔型设计,使短玻璃板可靠挤压密封条台阶,避免了旋转式边卡玻璃抬升不到位而漏液现象;按压式锁紧设计,避免了弹簧压力不够或老化造成漏胶现象;灌胶框按压锁紧方式,紧固效果更佳

WIX快速转印系统只需3-7分钟即可完成小型凝胶或中型凝胶转印,单次运行可转印1-4块小型胶或1-2块中型胶,专利流体力学高效风冷散热,确保敢热良好,提高抽屉使用寿命,灵活设计:允许用户自定义转印条件,与传统的半于ME印消耗品相同,独立控制:两个抽屉可独立设置转印条件,单独或同时使用。


3、转印


转印膜:

目录号

产品描述

产品特点及优势

孔径

IPVH00010

Immobilon-P PVDF transfer membrane roll

经典PVDF转印膜

0.45μm

ISEQ00010

Immobilon-PSQ PVDF transfer membrane roll

小孔径PVDF转印膜,适合小分子蛋白/肽检测、低丰度蛋白检测

0.2μm

IPFL00010

Immobilon-FL PVDF transfer membrane roll

低荧光背景PVDF转印膜

0.45μm

IEVH00005

Immobilon-E PVDF transfer membrane roll

即用型亲水型PVDF转印膜,无需甲醇预润湿

0.45μm

HATF00010

Immobilon-NC transfer membrane roll

硝酸纤维素转印膜

0.45μm

INYC00010

Immobilon-NY+ transfer membrane roll

带正电尼龙膜

0.45μm


化学发光底物:

目录号

产品描述

产品特点及优势

WBKLS0500

Immobilon Western Chemiluminescent HRP Substrate

高fg级HRP底物,超高性价比

WBKLS0100

WBULS0500

Immobilon ECL Ultra Western HRP Substrate

低fg级超敏HRP底物

WBULS0100

WBLUF0500

Immobilon Forte Western HRP substrate

低fg级超敏HRP底物,单瓶预混型,常温存放

WBLUR0500

Immobilon Crescendo Western HRP substrate

低pg级HRP底物,单瓶预混型,价格便宜

 

 

HRP底物免疫信号增强试剂/封闭剂/抗体剥离试剂

目录号

产品描述

产品特点及优势

WBSH0500

Immobilon Signal Enhancer for Immunodetection

单瓶装,用作封闭剂/一抗、二抗稀释液,大幅增加低丰度蛋白检测成功率,节省抗体

407207

SignalBoost™Immunoreaction Enhancer Kit

一抗稀释液和二抗稀释液各200mL,大幅增加低丰度蛋白检测成功率,节省抗体

70955

5% Alkali-soluble Casein

碱性酪蛋白溶液

WBAVDCH01

blok - CH Chemiluminescent Blocker

无蛋白成分小分子封闭剂

2504

ReBlot Plus Strong Solution

加强型抗体剥离试剂,用于二次WB检测


SNAP id加速器

SNAP i.d.® 2.0加速器利用真空抽 吸促使液体穿膜而过,大大减少了反应时间,提高了操作效率。这种创新的技术使抗原-抗体结合更快,非特异性结合或吸附降低,漂洗更充 分,而Western Blotting的整体效果更加优化。

目录号

产品描述

产品特点及优势

SNAP2MB1

SNAP i.d. 2.0 Protein Detection System-Mini and MultiBlot

带有一个mini (7.5 x 8.4 cm)和一个multi(4.5 x 8.4 cm)框架

SNAP2MB2

SNAP i.d. 2.0 Protein Detection System-Midi and MultiBlot 

带有一个midi(8.5 x 13.5 cm)和 一个Multi(4.5 x 8.4 cm)框架

SNAP2MB3

SNAP i.d. 2.0 Protein Detection System-Double MultiBlot

带有两个multi (4.5 x 8.4 cm)框架

SNAP2MINI

SNAP i.d. 2.0 ProteinDetectionSystemMini

带有两个mini (7.5 x 8.4 cm)框架

SNAP2IHC2

SNAP i.d. 2.0 Protein Detection System -

带有两个IHC框架,可同时处理24张切片

 

 

4、成像-Azure凝胶成像系统

化学发光成像分析系统可以直接获取 Western Blot和各种核酸,蛋白电泳和化学发光图像。酶标记抗体取代了放射性标记抗体, 当它作用于底物时,可产生光信号。多数特异抗原检测方法以辣根过氧化物酶(HRP)或碱性磷酸酶(AP) 二级抗体偶联物为基础。信号可通过感光胶片或专用的成像设备来采集。化学发光底物用于免疫印迹技术已有十几年的历史,大部分实验室做转印时都会采用化学发光技术进行检测。系统可以通过软件直接进行图像的采集,处理,分析打印等基本操作。系统配备了高端制冷CCD,确保图像在低照度下的灵敏度。是同位素检测的一种高度灵敏的替代方法。


 

 

 


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