Western Blot整体解决方案
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Western Blot是一种非常经典的定性、定量检测蛋白表达的方法。其原理通俗来说:采用聚丙烯酰胺凝胶电泳,蛋白质是被检测物,“探针”是抗体,“显色”用标记的二抗。经过PAGE分离的蛋白质样品,转移到固相载体(例如PVDF薄膜)上,固相载体以非共价键形式吸附蛋白质,且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原,与对应的抗体起免疫反应,再与酶或同位素标记的第二抗体起反应,经过底物显色或放射自显影以检测电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白成分。
1、样本制备--蛋白抽提
总蛋白/可溶蛋白抽提
目录号 | 产品描述 | 用途 | 产品特点 |
BugBuster®master Mix | 细菌裂解,可溶活性蛋白抽提,重组表达蛋白抽提 | BugBuster系列采用专利的表面活性剂配方,用于高效抽提细菌活性可溶蛋白以及高纯度包涵体,无需剧烈的弗氏压榨或超声等,10-20分钟常温孵育即可。产品形式多样,满足各种优化需求。 | |
BugBuster®Protein Extraction Reagent | |||
CelLytic™ B Cell Lysis Reagent | zwitterionic非变性表面活性剂配方,较超声和溶菌酶抽提产量更高,提供多种产品形式满足不同要求。B7310和C8740分别为2×和10×浓缩液(还可用于酵母和哺乳动物细胞抽提),提供多种不同包装形式 | ||
RIPA Buffer | 哺乳动物细胞蛋白抽提 | 温和配方,减少蛋白非特性结合,产物适用于IP、pulldown和WB | |
RIPA Lysis Buffer, 10X | 温和配方,10×浓缩形式,性价比高,产物适用于IP和WB | ||
CelLytic™ M | 比冻融和超声法抽提产量提高50%以上,产物适用于报告基因分析、IP、WB、EMSA、激酶分析、磷酸酶分析等 | ||
CytoBuster™ Protein Extraction Reagent | 哺乳动物/昆虫细胞蛋白抽提 | 温和的非离子型表面活性剂专利配方,高效抽提可溶活性蛋白,无需冻融和超声处理,抽提产物可用于免疫沉淀和激酶分析等;提供中文操作说明书 | |
CelLytic™ MT Cell Lysis Reagent | 哺乳动物组织蛋白抽提 | 温和非变性即用型配方,20 mL用于1g组织裂解抽提 |
裂解/抽提优化产物
目录号 | 产品描述 | 用途 | 产品特点 |
Benzonase®Nuclease | 高效、广谱降解各种形式的DNA和RNA,降低样品粘度,提高蛋白产量 | 纯度≥90%,浓度≥250 units/μL | |
Benzonase®Nuclease, Purity > 90% | 纯度≥90%,常规浓度25-29U/µl,HC级别的浓度为250 U/μL,提供中文说明书 | ||
Benzonase®Nuclease HC, Purity > 90% | |||
Benzonase®Nuclease, Purity > 99% | 纯度≥99%, 常规浓度25-29U/µl,HC级别的浓度为250 U/μL内毒素< 0.25 EU/1000U,提供中文说明书 | ||
Benzonase®Nuclease HC, Purity > 99% | |||
Lysozyme from chicken egg white | 消化细菌细胞壁,原生质体制备 | 溶菌酶干粉 | |
Lysozyme from chicken egg white | 溶菌酶干粉,≥90%, ≥40,000 units/mg protein | ||
Lyticase from Arthrobacter luteus | 消化真菌细胞壁,酵母原生质体制备 | 溶壁酶干粉,≥2,000 units/mg protein | |
Miracloth | 匀浆过滤,原生质体制备 | 神奇滤布,是一种孔径为22-25 μm的聚酯人造纤维滤布,用于分离原生质体、细胞匀浆过滤、核酸纯化等。18 in. x 50 ft. | |
ProteoExtract®Protein Precipitation Kit | 蛋白沉淀 | 快速浓缩蛋白、去除杂质,产物得率>90%,可用于IEF,1D/2DEG及质谱分析等 |
蛋白定量试剂盒
目录号 | 产品描述 |
BCA Protein Assay Kit | |
Bicinchoninic Acid Kit for Protein Determination | |
Bradford Reagent for 0.1-1.4 mg/ml protein |
蛋白/大分子脱盐、浓缩、缓冲液置换
目录号 | 产品描述 | 截留分子量 |
Amicon Ultra 0.5mL | 3kDa | |
Amicon Ultra 0.5mL | 3kDa | |
Amicon Ultra 0.5mL | 10kDa | |
Amicon Ultra 0.5mL | 10kDa | |
Amicon Ultra 0.5mL | 30kDa | |
Amicon Ultra 0.5mL | 30kDa | |
Amicon Ultra 0.5mL | 50kDa | |
Amicon Ultra 0.5mL | 50kDa | |
Amicon Ultra 0.5mL | 100kDa | |
Amicon Ultra 0.5mL | 100kDa | |
Amicon Ultra 4mL | 3kDa | |
Amicon Ultra 4mL | 10kDa | |
Amicon Ultra 4mL | 30kDa | |
Amicon Ultra 4mL | 50kDa | |
Amicon Ultra 4mL | 100kDa | |
Amicon Ultra 15mL | 3kDa | |
Amicon Ultra 15mL | 10kDa | |
Amicon Ultra 15mL | 30kDa | |
Amicon Ultra 15mL | 50kDa | |
Amicon Ultra 15mL | 100kDa |
2、电泳
预制胶:
目录号 | 产品描述 | 产品形式/包装规格 | 优势和特点 |
TruPAGE precast gels 4-12%, 10 x 10cm, 12-well | 2块,10块 | • 保质期长:2~8℃ 条件下可稳定保存2年 | |
TruPAGE precast gels 12%, 10 x 8cm, 12-well | 2块,10块 | ||
TruPAGE precast gels 4-12%, 10 x 8cm, 12-well | 2块,10块 | ||
TruPAGE precast gels 4-20%, 10 x 8cm, 12-well | 2块,10块 | ||
TruPAGE precast gels 4-12%, 10 x 8cm, 17-well | 2块,10块 | ||
precast gels 1.0% 8-well (portrait orientation) | 20块 |
蛋白Marker
目录号 | 产品描述 | 优势和特点 |
ColorBurst™ Electrophoresis Marker (M.W. 8,000–220,000) | • ColorBurst 蛋白分子量标准色彩明亮、解析度上佳、方便、稳定,可在各种不同胶组成和浓度下取得出色的检测效果。 | |
Color Marker Ultra-low Range (M.W. 1,060-26,600) | • Sigma显色蛋白分子量标准含有5-6种显色染料标记的蛋白,能用来监测蛋白质电泳迁移和电转效果。 | |
Ultra-low Range Molecular Weight Marker (M.W. 1,060-26,600) | ||
Vetec™ reagent grade, low range, mol wt 12,000-80,000 Da |
WIX电泳系列:
WIX垂直电泳槽质保五年,配件通用性价比高可容纳1-4块手灌胶或预制胶,1小时内完成多达4块小型凝胶电泳;灌胶框底部独有超平玻璃支撑,有效避免了玻璃板滑落及试验台不平致使玻璃板错位问题;)电泳芯边卡滑动楔型设计,使短玻璃板可靠挤压密封条台阶,避免了旋转式边卡玻璃抬升不到位而漏液现象;按压式锁紧设计,避免了弹簧压力不够或老化造成漏胶现象;灌胶框按压锁紧方式,紧固效果更佳
WIX快速转印系统只需3-7分钟即可完成小型凝胶或中型凝胶转印,单次运行可转印1-4块小型胶或1-2块中型胶,专利流体力学高效风冷散热,确保敢热良好,提高抽屉使用寿命,灵活设计:允许用户自定义转印条件,与传统的半于ME印消耗品相同,独立控制:两个抽屉可独立设置转印条件,单独或同时使用。
3、转印
转印膜:
目录号 | 产品描述 | 产品特点及优势 | 孔径 |
Immobilon-P PVDF transfer membrane roll | 经典PVDF转印膜 | 0.45μm | |
Immobilon-PSQ PVDF transfer membrane roll | 小孔径PVDF转印膜,适合小分子蛋白/肽检测、低丰度蛋白检测 | 0.2μm | |
Immobilon-FL PVDF transfer membrane roll | 低荧光背景PVDF转印膜 | 0.45μm | |
Immobilon-E PVDF transfer membrane roll | 即用型亲水型PVDF转印膜,无需甲醇预润湿 | 0.45μm | |
Immobilon-NC transfer membrane roll | 硝酸纤维素转印膜 | 0.45μm | |
Immobilon-NY+ transfer membrane roll | 带正电尼龙膜 | 0.45μm |
化学发光底物:
目录号 | 产品描述 | 产品特点及优势 |
Immobilon Western Chemiluminescent HRP Substrate | 高fg级HRP底物,超高性价比 | |
Immobilon ECL Ultra Western HRP Substrate | 低fg级超敏HRP底物 | |
Immobilon Forte Western HRP substrate | 低fg级超敏HRP底物,单瓶预混型,常温存放 | |
Immobilon Crescendo Western HRP substrate | 低pg级HRP底物,单瓶预混型,价格便宜 |
HRP底物免疫信号增强试剂/封闭剂/抗体剥离试剂
目录号 | 产品描述 | 产品特点及优势 |
Immobilon Signal Enhancer for Immunodetection | 单瓶装,用作封闭剂/一抗、二抗稀释液,大幅增加低丰度蛋白检测成功率,节省抗体 | |
SignalBoost™Immunoreaction Enhancer Kit | 一抗稀释液和二抗稀释液各200mL,大幅增加低丰度蛋白检测成功率,节省抗体 | |
5% Alkali-soluble Casein | 碱性酪蛋白溶液 | |
blok - CH Chemiluminescent Blocker | 无蛋白成分小分子封闭剂 | |
ReBlot Plus Strong Solution | 加强型抗体剥离试剂,用于二次WB检测 |
SNAP id加速器
SNAP i.d.® 2.0加速器利用真空抽 吸促使液体穿膜而过,大大减少了反应时间,提高了操作效率。这种创新的技术使抗原-抗体结合更快,非特异性结合或吸附降低,漂洗更充 分,而Western Blotting的整体效果更加优化。
目录号 | 产品描述 | 产品特点及优势 |
SNAP i.d. 2.0 Protein Detection System-Mini and MultiBlot | 带有一个mini (7.5 x 8.4 cm)和一个multi(4.5 x 8.4 cm)框架 | |
SNAP i.d. 2.0 Protein Detection System-Midi and MultiBlot | 带有一个midi(8.5 x 13.5 cm)和 一个Multi(4.5 x 8.4 cm)框架 | |
SNAP i.d. 2.0 Protein Detection System-Double MultiBlot | 带有两个multi (4.5 x 8.4 cm)框架 | |
SNAP i.d. 2.0 ProteinDetectionSystemMini | 带有两个mini (7.5 x 8.4 cm)框架 | |
SNAP i.d. 2.0 Protein Detection System - | 带有两个IHC框架,可同时处理24张切片 |
4、成像-Azure凝胶成像系统
化学发光成像分析系统可以直接获取 Western Blot和各种核酸,蛋白电泳和化学发光图像。酶标记抗体取代了放射性标记抗体, 当它作用于底物时,可产生光信号。多数特异抗原检测方法以辣根过氧化物酶(HRP)或碱性磷酸酶(AP) 二级抗体偶联物为基础。信号可通过感光胶片或专用的成像设备来采集。化学发光底物用于免疫印迹技术已有十几年的历史,大部分实验室做转印时都会采用化学发光技术进行检测。系统可以通过软件直接进行图像的采集,处理,分析打印等基本操作。系统配备了高端制冷CCD,确保图像在低照度下的灵敏度。是同位素检测的一种高度灵敏的替代方法。