N-Terminus pQE Vector Set

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  • 品牌:Qiagen/凯杰
  • 货号:32915
  • 规格:1kit
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    吉林省

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看了又看换一换

商品名称:N-Terminus pQE Vector Set

  • 货号:32915
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Features

  • 在所有三个阅读框中具有 MCS 的 pQE-30 载体可用于快速克隆
  • pQE-40 载体可用于低表达蛋白质和短肽
  • pQE-40 载体可表达 DHFR 融合蛋白,从而增强稳定性和抗原性
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Product Details

该套组提供 5 种载体(pQE-9、pQE-30、pQE-31、pQE-32 和 pQE-40),用于 N-末端 His 标签蛋白的表达。pQE-30、pQE-31 和 pQE-32 在所有三个阅读框中提供多克隆位点 (multiple cloning site, MCS),而 pQE-9 仅具有一个较短的替代多克隆位点。pQE-40 设计用于 DHFR 融合蛋白的表达,并且被推荐用于低表达蛋白质或短肽的表达,这些蛋白质或短肽通常易于蛋白水解,因为 DHFR 增强了稳定性和抗原性。由于 DHFR 本身在小鼠和大鼠中几乎没有免疫原性,因此 DHFR 融合蛋白非常适合用于表位筛选。

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Principle

QIAexpress pQE 载体中存在的元件
元件 说明
优化的启动子/操作子元件 由噬菌体 T5 启动子和两个 lac 操作子序列组成,这增加了 lac 阻遏物结合的可能性,并确保强效 T5 启动子的有效抑制
合成核糖体结合位点 RBSII 用于高效翻译
6xHis 标签编码序列 5' 或 3' 到多位点人工接头克隆区
翻译终止密码子 在所有阅读框架中,用于方便地制备表达构建体
两个强转录终止子 t0 来自噬菌体 λ,T1 来自 E. colirrnB 操纵子,以阻止连读转录并确保表达构建体的稳定性
ColE1 复制起点 来自 pBR322
β-内酰胺酶基因 (bla) 赋予氨苄青霉素耐药性

 

 

 

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Procedure

将编码目标蛋白质的插入片段克隆到合适的构建体中(详细信息请参阅《QIAexpressionist 手册》),并转化至合适的 E. coli 菌株中进行表达。通过添加 IPTG 来诱导表达。载体 pQE TriSystem 构建体可以转化至 E. coli 中,用作昆虫细胞中重组蛋白表达的穿梭载体,或转染至哺乳动物细胞中。

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Applications

QIAexpress Expression System 提供适用于许多应用的蛋白质高水平表达,包括:

  • 功能性构象活性蛋白质的纯化
  • 在变性条件下进行纯化用于抗体生产
  • 结晶用于三维结构测定
  • 涉及蛋白质–蛋白质和蛋白质–DNA 相互作用的检测
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