纯水耗材

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  • 品牌:Thermo/赛默飞
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商品名称:纯水耗材

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支持性数据

反应性 H M R Mk
灵敏度 内源性
MW (kDa) 17
来源/同种型 兔 IgG

应用关键词:

  • WB- 蛋白质印迹法
  • IP-免疫沉淀法
  • IHC-免疫组织化学法
  • ChIP-染色质免疫沉淀法
  • C&R - CUT&RUN
  • C&T - CUT&Tag
  • DB - 点印迹
  • eCLIP - eCLIP
  • IF-免疫荧光法
  • F-流式细胞术

物种交叉反应性关键词:

  • H-人
  • M-小鼠
  • R-大鼠
  • Hm- 仓鼠
  • Mk-猴
  • Vir- 病毒
  • Mi-水貂
  • C-鸡
  • Dm-黑腹果蝇
  • X-爪蟾
  • Z-斑马鱼
  • B-牛
  • DG-犬
  • PG-猪
  • Sc-酿酒酵母
  • Ce-秀丽隐杆线虫
  • Hr-马
  • All-预期所有物种

产品使用信息

为了获得最佳的 ChIP 和 ChIP-seq 结果,每次免疫沉淀使用 10 μl 抗体和 10 μg 染色质(大约 4 x 106 个细胞)。该抗体已使用 SimpleChIP Enzymatic Chromatin IP Kits 进行了验证。

应用 稀释度
蛋白质印迹法 1:1000
免疫荧光法(免疫细胞化学) 1:200 - 1:800
流式细胞术(固定/通透) 1:200 - 1:800
染色质免疫沉淀法 1:50
ChIP-seq 1:50

背景

核小体由四个核心组蛋白(H2A、H2B、H3 和 H4)组成,是染色质的主要组成部分。最初被认为可作为 DNA 包装的静态支架的组蛋白现在已被证明是动态蛋白,可进行多种类型的翻译后修饰,包括乙酰化、磷酸化、甲基化和泛素化 (1)。组蛋白甲基化是形成基因组的活跃和非活跃区域的主要决定因素,并且在发育期间基因组的正确编程过程中发挥关键作用 (2,3)。组蛋白 H3 (Arg2, 17, 26) 和 H4 (Arg3) 的精氨酸甲基化可促进转录激活,并由蛋白精氨酸甲基转移酶 (PRMTs) 家族介导,该家族包括辅助激活因子 PRMT1 和 CARM1 (PRMT4) (4)。与此相反,已确定更多样化的组蛋白赖氨酸甲基转移酶,除了其中某个外其余的都含有一个保守催化 SET 结构域,该结构域最初在果蝇 Su(var)3-9、zeste 增强子和 Trithorax 蛋白中得以确认。赖氨酸甲基化主要发生在组蛋白 H3 (Lys4 位点, 9, 27, 36, 79) 和 H4 (Lys20 位点) 中,并已确定与转录激活和沉默有关 (4)。这些赖氨酸残基的甲基化可协调染色质修饰酶的募集,这些酶含有甲基赖氨酸结合模块,例如克罗莫结构域 (HP1, PRC1)、PHD fingers (BPTF, ING2)、tudor 结构域 (53BP1) 和 WD-40 结构域 (WDR5) (5-8)。PADI4、LSD1、JMJD1、JMJD2 和 JHDM1 等组蛋白脱甲基酶的发现表明:甲基化是可逆的表观遗传标记物 (9)。
  1. Peterson, C.L. and Laniel, M.A. (2004) Curr Biol 14, R546-51.
  2. Kubicek, S. et al. (2006) Ernst Schering Res Found Workshop, 1-27.
  3. Lin, W. and Dent, S.Y. (2006) Curr Opin Genet Dev 16, 137-42.
  4. Lee, D.Y. et al. (2005) Endocr Rev 26, 147-70.
  5. Daniel, J.A. et al. (2005) Cell Cycle 4, 919-26.
  6. Shi, X. et al. (2006) Nature 442, 96-9.
  7. Wysocka, J. et al. (2006) Nature 442, 86-90.
  8. Wysocka, J. et al. (2005) Cell 121, 859-72.
  9. Trojer, P. and Reinberg, D. (2006) Cell 125, 213-7.
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