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商品名称：GFP (5G4) Mouse mAb

货号：55494S

支持性数据

反应性	H M R Mk
灵敏度	内源性
MW (kDa)	23
来源/同种型	兔 IgG

应用关键词：

WB- 蛋白质印迹法
IP-免疫沉淀法
IHC-免疫组织化学法
ChIP-染色质免疫沉淀法
C&R - CUT&RUN
C&T - CUT&Tag
DB - 点印迹
eCLIP - eCLIP
IF-免疫荧光法
F-流式细胞术

物种交叉反应性关键词：

H-人
M-小鼠
R-大鼠
Hm- 仓鼠
Mk-猴
Vir- 病毒
Mi-水貂
C-鸡
Dm-黑腹果蝇
X-爪蟾
Z-斑马鱼
B-牛
DG-犬
PG-猪
Sc-酿酒酵母
Ce-秀丽隐杆线虫
Hr-马
All-预期所有物种

产品使用信息

为了获得最佳的 ChIP 结果，每次免疫沉淀使用 2.5 μl 抗体和 10 μg 染色质（大约 4 x 10⁶ 个细胞）。该抗体已使用 SimpleChIPEnzymatic Chromatin IP Kits 进行了验证。

应用	稀释度
蛋白质印迹法	1:1000
免疫荧光法（免疫细胞化学）	1:1600
流式细胞术（固定/通透）	1:400 - 1:1600
染色质免疫沉淀法	1:200

背景

核小体由四个核心组蛋白（H2A、H2B、H3 和 H4）组成，它是染色质的主要成分。组蛋白最初被认为是作为 DNA 包装的静态支架蛋白起作用，但现在已被证明是一种经过多种类型翻译后修饰的动态蛋白，包括乙酰化、磷酸化、甲基化和泛素化 (1)。泛素是一种保守的 76 氨基酸肽单元，能通过泛素化过程共价连接多个细胞蛋白。这个蛋白-泛素接合过程涉及三种组分。泛素首先通过与激活组分 E1 形成硫酯复合体而被激活；激活的泛素继而转运到泛素载体蛋白 E2，然后从 E2 转运到泛素连接酶 E3，最后转运到靶标蛋白赖氨酸残基的 ε-NH2 (2)。在转录激活期间，RAD6 E2 蛋白和 BRE1A/BRE1B E3 连接酶（也称为 RNF20/RNF40）在赖氨酸 120 上单泛素化组蛋白 H2B (3)。在激活期间，RAD6/BRE1 复合体被 PAF 复合体募集到基因启动子，PAF 复合体是一种调节转录延伸的 RNA 聚合酶 II 结合蛋白复合体 (3-5)。单泛素化的组蛋白 H2B 赖氨酸 120 与活化基因的转录区域结合 (3,6)。单泛素化的组蛋白 H2B 通过促进 FACT 依赖性染色质重构刺激转录延伸 (7,8)。此外，它对于随后的组蛋白 H3 赖氨酸的甲基化 4 以及 79 另外两种调节转录起始和延伸的组蛋白修饰非常重要 (9)。有趣的是，USP22（人 SAGA 组蛋白乙酰转移酶复合体的亚基）对组蛋白 H2B 赖氨酸 120 的去泛素化是转录激活的一个必需步骤 (10)。因此，在转录期间，组蛋白 H2B 的泛素化是动态的，可以作为转录激活的一个中间步骤。

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