产品说明
SimpleChIP
Human IFN-γ Promoter Primers 包含对人干扰素 γ 启动子的某个区域具有特异性的正向和反向 PCR 引物混合物。这些引物可用于扩增经染色质免疫沉淀法 (ChIP) 分离的 DNA。引物经优化可用于 SYBR
Green 定量实时 PCR，并连同 Cell Signaling Technology
的 SimpleChIP
Enzymatic Chromatin IP Kits #9002 和 #9003 以及经 ChIP 验证的抗体进行了测试。IFN-γ 是先天性和适应性免疫的一种重要细胞因子。IFN-γ 主要由自然杀伤细胞产生，它是巨噬细胞的一种有效激活蛋白。
背景
染色质免疫沉淀 (ChIP) 测定法是一种用于在细胞天然染色质背景下探测蛋白质-DNA 相互作用的强大的通用技术 (1,2)。这种测定法用于检测与基因组某个特定区域有关的多种蛋白，或检测某种特殊蛋白结合的基因组的多个区域 (3-6)。ChIP 可用于确定各种蛋白被募集到某个基因启动子上的特定顺序，或用于“测定”整个基因位点上某种特定组蛋白修饰的相对数量 (3,4)。除了组蛋白外，ChIP 测定法还可用于分析转录因子与辅助因子、DNA 复制因子和 DNA 修复蛋白的结合。进行 ChIP 检测时，细胞首先用甲醛固定，甲醛是一种可逆的蛋白-DNA 交联剂，可以“维持”细胞内发生的蛋白-DNA 相互作用 (1,2)。细胞进行裂解，染色质采集后使用超声处理或酶消化法进行碎裂。碎裂的染色质随后使用对某种特殊蛋白或组蛋白修饰具有特异性的抗体进行免疫沉淀。任何与目标蛋白或组蛋白修饰有关的 DNA 序列都会作为交联染色质复合体的一部分进行共沉淀，并且该 DNA 序列的相对数量会在免疫选择过程中达到富集。免疫沉淀后，蛋白质-DNA 交联被逆转，DNA 得以纯化。标准 PCR 或定量实时 PCR 常用于测量通过蛋白特异性免疫沉淀达到富集的特定 DNA 序列数量 (1,2)。或者，ChIP 测定法还可与基因组微芯片（芯片上的 ChIP）技术、高通测序 (ChIP-Seq) 或克隆策略联合使用，它们都能对蛋白-DNA 相互作用和组蛋白修饰进行全基因组分析 (5-8)。SimpleChIP
引物经优化可用于通过实时定量 PCR 扩增 ChIP 分离的 DNA，并提供用于确认 ChIP 试验是否成功的重要阳性和阴性对照。
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Orlando, V. (2000) Trends Biochem Sci 25, 99-104.
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粤公网安备 44031102000815号
