商品名称:QIAGEN Multiplex PCR Kit (1000)
QIAGEN Multiplex PCR Kit提供方便的即用型预混液。QIAGEN Multiplex PCR Master Mix包含HotStarTaq DNA Polymerase和含有新型合成因子MP的独特PCR缓冲液。配合优化的盐浓度,MP因子可以促进引物与模板的特异性结合,使反应体系中所有的引物都能有效延伸,无需额外优化。该试剂盒还包含新型的辅助剂Q-Solution,有助于实现“困难”模板(比如,GC含量高的模板)的高效扩增。
QIAGEN Multiplex PCR Kit可确保高特异性和灵敏度的多重PCR扩增(参见" Successful 16-plex PCR ")。该试剂盒能成功应用于各种多重应用,如转基因生物分型(参见" Genotyping transgenic mice")和微卫星分析(参见" Successful microsatellite analysis ")。该混合物包含HotStarTaq DNA Polymerase,用于高效的平行扩增多个靶。扩增效率经新型的PCR缓冲液进一步优化,该缓冲液也包含在混合物中。独特的缓冲液确保了在广泛的PCR条件下PCR的特异性,无需优化步骤。试剂盒还包含辅助剂Q-Solution,用于扩增高GC含量的模板,优化PCR反应。
浓度:5单位/µl
重组酶:有
底物类似物:dNTP、ddNTP、dUTP、biotin-11-dUTP、DIG-11-dUTP、荧光-dNTP/ddNTP
延伸率:72°C下2–4 kb/分钟
半衰期:97°C下10分钟;94°C下60分钟
扩增效率:≥105倍
5'–>3'外切酶活性:有
Extra A辅助剂: 有
3'–>5'外切酶活性:无
污染核酸:无
污染RNA酶:无
污染蛋白酶:无
自吸泵活性:无
QIAGEN Multiplex PCR Kit是首个专为多重PCR研发的试剂盒,有即用型混合液规格。QIAGEN Multiplex PCR Master Mix包含预优化浓度的HotStarTaq DNA Polymerase和MgCl2、dNTPs和新型的PCR缓冲液专为多重PCR研发。该试剂盒在首次尝试多重PCR即获得成功。由于试剂盒内独特的预优化的试剂无需优化反应条件(比如,引物浓度,Mg2+和Taq DNA聚合酶)和循环参数。
HotStarTaq DNA Polymerase对 Taq DNA聚合酶进行改善,在室温下无聚合酶活性。这可以防止非特异性退火引物和在低温条件下的PCR设置和初始的PCR循环中形成引物二聚体。在95°C下,经15分钟诱导可激活HotStarTaq DNA Polymerase,可纳入各种现有的热循环程序中。
这特殊的缓冲液包含优化的由K+和NH4+以及独特的PCR辅助剂、MP因子可增加模板引物的局部浓度。配合K+和其他阳离子、MP因子稳定特异性结合的引物,并能够用HotStarTaq DNA Polymerase进行高效的引物延伸(参见" Stable and efficient primer annealing")。通过在每个PCR循环中高比率的特异性-非特异性引物结合,该新型的缓冲液维持每个PCR循环的特异性扩增。由于KCl和(NH4)2SO4独特的平衡结合,相比传统的PCR缓冲液,该缓冲液能在更广泛的退火温度和Mg2+浓度下,提供严格的引物退火条件。通过改变退火温度或Mg2+浓度可优化PCR,因此通常将优化过程最小化或无需要优化。
Q-Solution是一种新型的PCR辅助剂,有助于扩增由DNA融化特性修改的困难模板,同时配合HotStarTaq DNA Polymerase提供。该独特的试剂可优化高度二级结构或富含GC的模板所致的效果欠佳的PCR。不同于其他常用的PCR辅助剂如DMSO,Q-Solution只用于一种工作浓度,并保证无毒和PCR纯度好。
QIAGEN Multiplex PCR Kit含有即用型、预优化的混合液,非常方便。使用混合液节省时间、简化反应体系构建流程,并通过消除移液失误和污染,增加可靠性,减少移液步骤和繁琐的计算。只需加入引物和模板来制备最终扩增混合液。混合液可在2–8°C储存,可快速设置多重PCR检测。该试剂盒提供的精简的实验方案确保快速简单的PCR设置。可在室温下设置反应,简单方便,易于使用。HotStarTaq DNA Polymerase可在95°C下孵育15分钟激活,因此可整合入各种现有的热循环流程中。
QIAGEN Multiplex PCR Kit高度适用于各种多重应用,包括: