QuantiTect Whole Transcriptome Kit (25)

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  • 品牌:Qiagen/凯杰
  • 货号:207043
  • 规格:1kit
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    吉林省

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看了又看换一换

商品名称:QuantiTect Whole Transcriptome Kit (25)

  • 货号:207043
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Features

  • 高cDNA产量用于无限次分析和长期保存
  • 均一扩增所有cDNA和所有转录本区段
  • 经优化的试剂,快速简单的操作流程
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Product Details

QuantiTect Whole Transcriptome Kit对有限的RNA样品进行预扩增和逆转录,获得高产量cDNA,用于无限次real-time PCR基因表达分析。该试剂盒包含全转录扩增所需的全部酶和缓冲液。对Phi29聚合酶创新的修饰确保从低至1 ng RNA中制备多至40 μg cDNA。该聚合酶独特的加工过程可制备高度统一的cDNA,确保通过real-time PCR进行可靠的基因表达分析。

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Performance

" href="https://www.qiagen.com/binary/resource/BC_0244_QTWholeTrans/1_5_WebFullSizeImage.jpg"> Equal amplification of 5' and 3' regions")。图" Preservation of transcript profile", 显示高度稳定的转录子,该图将分别应用QuantiTect Whole Transcriptome Kit全基因组扩增的cDNA和用逆转录酶制备的未扩增cDNA进行了对比。

可获得多至40 μg的可重复、高产量的cDNA(参见" Reproducible cDNA yields")。能够进行无限次real-time PCR分析,并具有高度重复性的CT值(参见" Reliable real-time PCR analysis")。此外,由于cDNA比RNA更稳定,可以存档用于以后的研究工作。

高产量的cDNA可用于real-time PCR分析
起始材料 扩增时间 扩增产物的常规产量 可进行的real-time PCR次数*
10 ng RNA 2小时 至多10 µg cDNA 1000
10 ng RNA 8小时 至多40 µg cDNA 4000
* 从一次QuantiTect whole transcriptome amplification (WTA)扩增反应得到的cDNA可进行的real-time PCR次数。不使用WTA,10 ng RNA只能进行一次可靠的real-time RT-PCR分析。
See figures
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Principle

获得的生物样本量太少可能限制基因表达谱分析。使用QuantiTect Whole Transcriptome Kit可对少量珍贵的样品进行无限次real-time PCR分析。QuantiTect Whole Transcriptome Kit经优化,用于1 ng RNA或相当于约50个细胞RNA的全转录扩增,甚至可以用更少量的RNA,这些取决于RNA的品质和转录子的丰度。

QuantiTect Whole Transcriptome Kit含有逆转录酶、DNA聚合酶和优化的缓冲液及试剂,可对一个RNA样本的所有转录本进行扩增。此试剂盒整合了经质量验证的REPLI-g技术,通过非偏向序列扩增来合成cDNA。REPLI-g扩增采用Multiple Displacement Amplification(MDA)技术,应用独特加工的DNA聚合酶实现等温扩增(参见" Whole transcriptome amplification")。该技术确保包括5’末端在内的所有转录区的同等扩增,从而获得可用于real-time PCR的足够多的cDNA。

Equal amplification of 5' and 3' regions.

Total RNA (1 ng) was amplified using the QuantiTect Whole Transcriptome Kit. This was followed by real-time PCR using 10 ng cDNA, primers specific for β-actin, and the QuantiTect SYBR® Green PCR Kit. Amplicons corresponding to the 5' and 3' regions of the β-actin transcript were detected with similar CT values, indicating that the QuantiTect Whole Transcriptome Kit provided equal amplification of all transcript regions.
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See figures
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Procedure

销售区域
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