商品名称:组织消化液(RUO)
【预期用途】
用于从组织上消化原代干细胞,做后续细胞体外增值培养。
【检验原理】
以特定酶自组织块分离出原代间充质干细胞是常见的细胞培养技术。组织消化液利用数种重组表达的消化酶制备而成,无动物源成分。组织消化液针对组织的细胞外基质而设计, 不含胰酶,不会伤害细胞。可以有效地消化细胞外基质,进而从组织块 (脐带、脂肪、胎盘) 分离出大量的原代间充质干细胞,作为后续细胞增殖使用。
【主要组成成分】
由 DMEM -LG 基础培养基、膠原脢、分散脢、脱氧核糖核酸酶组成。
【适用范围】
收获组织 (脐带、脂肪、胎盘)的原代间充质干细胞, 做后续细胞体外增殖培养。
【储存条件及有效期】
应贮存在-20℃,有效期为1年。开封后存放4℃,注意避光,1周内使用。不建议反复冻融。
【生产日期与失效日期】
详见产品标签。
【使用方法】
以脐带组织为例
1. 将脐带用DPBS 漂洗干净,剪成1-50px大小,剔除血管。
2. 将组织块剪成3-5mm3,移入50ml离心管,再加入适量的分离液。
* 一条长度10公分的脐带建议加入10ml的分离液;或者组织块 : 分离液(vol)= 1:1。
** 视情况而定,可自行在分离液中添加1%青链双抗。
3. 把50ml离心管横放在37度细胞培养箱,过夜反应(16小时)。
* 若总反应体积较大,也可持续旋转混合。
4. 加入和分离液等体积的0.05%EDTA终止反应后,1500 xg离心5分钟,去除上清。
* 溶液比较浓稠,小心不要影响下层的细胞; 建议留下5ml左右的溶液。
** 没有EDTA, 可使用无钙镁DPBS取代。
5. 以和分离液等体积的无钙镁DPBS重悬细胞后,500 xg离心5分钟,去除上清。
6. 再次以和分离液等体积的无钙镁DPBS重悬细胞后,250 xg离心5分钟,去除上清。
7. 用适量的培养基重悬细胞后,即可按常规细胞培养方法接种P0代细胞培养。
* 消化后的原代细胞,建议培养时接种密度提高到10,000/cm2以上;传代后即可按常规的接种密度培养 。
以皮下脂肪组织块为例
1. 以DPBS将新鲜的皮下脂肪组织块漂洗干净,剔除明显的血管或血块。
2. 将组织块剪成3-5mm3,移入50ml离心管,再加入适量的分离液。
* 1克组织块可加入约5ml分离液。
** 视情况而定,可自行在分离液中添加1%青链双抗。
3. 把50ml离心管横放在37度细胞培养箱,反应4小时 (用户也可自行调整反应时间)。
* 若总反应体积较大,也可使用持续旋转混合。
4. 加入和分离液等体积的0.05%EDTA终止反应后,250 xg离心5分钟,去除上清。
* 没有EDTA, 也可使用无钙镁DPBS取代。
5. 以和分离液等体积的无钙镁DPBS重悬细胞后,250 xg离心5分钟,去除上清。
6. 再次以和分离液等体积的无钙镁DPBS重悬细胞后,250 xg离心5分钟,去除上清。
7. 用适量的培养基重悬细胞,再以100目的筛网过滤细胞液后,即可按常规细胞培养方法接种细胞培养。
* 消化后的原代细胞,建议培养时接种密度提高到10,000/cm2以上;传代后即可按常规的接种密度培养。
【产品性能指标】
1.pH值:7.0-8.0
2.渗透压(MOSM/KG):310-345
3.无菌检测:无菌
【注意事项】
1.严禁内服,不能用嘴吸液。
2.试剂包装如有破损或滴漏,严禁使用。
3.操作过程应避免污染。
4.操作人员万一与皮肤、粘膜接触,请立即用自来水冲洗。
5.禁止使用超出规定有效期的产品。
【生产企业】
生产地址:中国(上海)自由贸易试验区祖冲之路 1505弄80号12幢3楼C,D区
【售后服务单位】
上海达特希尔生物科技有限公司
【声明】
仅用于科研使用,不能用于临床诊断和治疗