商品名称:HRP化学发光增强试剂盒
【试剂盒成分】
1. 溶液A:发光氨和增强剂
2. 溶液B:H2O2溶液
注:溶液A和溶液B规格一样。
【产品介绍】
货号 |
规格 |
储存条件 |
20-500-120 |
1200cm2(120ml) |
4°C |
20-500-BL |
500ml |
4°C |
20-500-BK |
1000ml |
4°C |
化学发光增强试剂是即用型配方,适用于Western, Southern和Northern Blot,背景值极低,可以检测固定在膜上的直接或间接标记了HRP(辣根过氧化物酶)的抗原或者核酸的量。
Thorpe和Kricka1,2提出此方法,在过氧化氢(H2O2)存在下,HRP催化环状二酰基酰肼(Cycle Diacylhydrazides)化合物的氧化,如发光氨(Luminol)。此时的发光氨处在激发状态,转变为基态时就会发出光,光发射的持续增强是由增强剂(Enhancers)产生,如酚类化合物。
【使用客户】
凡进行 Western,Northern和Southern Blot实验时,若有HRP标记的情况下,都可用此EZ-ECL试剂盒。
【使用方法】
准备
在暗室内准备以下仪器和溶液:
1.X光片盒;
2.X光片;
3.计时器;
4.显影剂、定影剂和水置于容器中;
5.玻璃移液管;
6.无菌手套:防止手与膜、X光片或试剂接触。
检测
1.将等体积的EZ-ECL Solution A溶液和EZ-ECL Solution B溶液混合,以制备足够的检测混合液(0.1ml/cm2),让检测混合溶液达到平衡至少需5分钟;
2.将印迹膜中多余洗液排出,但不可使膜干燥;
3.在膜上有核酸或蛋白质的一面加上检测混合液,室温孵育1-3分钟;
4.排出多余的检测混合液,并用保鲜膜将膜包裹好,轻柔地赶出其中的气泡;
5.将膜放在X光片盒中(有核酸或蛋白质的一面朝上),关掉暗室内的灯,用红色安全灯照明。在膜上铺一层X光片,关紧盒,暴光30-60秒;
6.换一张新的X光片,关紧盒暴光,此时得到第一张暴光片;
7.根据第一张暴光片的信号强弱,选择合适的时间暴光第二张底片;
8.如果信号过强,30分钟后再暴光。
注:检测混合液放置时间不宜超过一周,否则稳定性会降低。
【产品特点】
1.高灵敏度,无放射性的检测系统
2.高分辨率,同时线性范围广
3.可得到稳定的结果
4.仅需少量抗体
5.所需暴露时间短,检测即可完成
【声明】
仅用于科研使用,不能用于临床诊断和治疗。
【说明书编制及修改日期】
2022年12月01