商品名称：SimpleChIP® Plus Sonication Chromatin IP Kit #56383
产品信息
保存
保存在推荐的温度下且未使用时，该试剂盒中的所有组分在超过组分标签上标明的参考日期后可保持稳定至少 12 个月。
实验步骤
产品说明
简单的 ® Plus Sonication Chromatin IP Kit 是一套完整的 ChIP 试剂盒。它包含对细胞或组织样品进行多达 24 次染色质免疫沉淀分析所需的缓冲液和试剂，优化后，每次免疫沉淀可使用 4 X 10 6 个细胞或 25 mg 组织。一项完整检测可在短达两天内完成，并且可在使用更多或更少细胞或组织样品时随意扩增或缩减。该试剂盒可用于 ChIP-qPCR 和 ChIP-seq。
细胞或组织用甲醛固定后进行裂解，染色质经超声处理被碎裂可获得 200-1000 bp 的染色质片段。基于超声处理的碎裂方法是一种比较传统的染色质碎裂方法，但超声处理应进行优化，才可使用最低的所需超声处理量来获得所需的片段大小，因为过度超声处理会降低免疫沉淀效率，尤其是对于转录因子和辅因子而言。该试剂盒中的细胞与胞核裂解缓冲液经优化可最大化组蛋白、转录因子和辅因子的富集。使用经 ChIP 验证的抗体和 ChIP-Grade Protein G Magnetic Beads 进行染色质免疫沉淀。在蛋白质-DNA 解交联后，DNA 使用 DNA 纯化离心柱进行纯化，以便简单快速地回收 DNA 并去除蛋白污染物，无需进行苯酚/氯仿提取和乙醇沉淀。免疫沉淀期间，特定 DNA 序列的富集可使用标准 PCR、定量实时 PCR、芯片 ChIP 扩增、测序或克隆技术等各种方法进行分析。
简单的 ®Plus Kit 还提供确保 ChIP 实验成功的重要对照。#56383 超声法 ChIP 试剂盒包含对人和小鼠核糖体蛋白 L30 (RPL30) 基因进行 PCR 检测所需的阳性对照 Histone H3 Antibody、阴性对照 Normal Rabbit IgG Antibody 和引物组。组蛋白 H3 是染色质的一种核心组分，能在基因组内结合多数 DNA 序列，包括 RPL30 基因座。由于几乎所有被检测基因座上富含Histone H3，因此，Histone H3 Antibody 可用作通用阳性对照。
特异性/灵敏度
简单的 ® Plus Sonication Chromatin IP Kit 可与经 ChIP 验证的抗体一同用来检测哺乳动物细胞和组织样品中内源水平的蛋白-DNA 相互作用和组蛋白修饰（见图 1-4）。该试剂盒中的细胞与胞核裂解缓冲液经优化可最大化富集包含组蛋白、转录因子和辅因子的染色质。阳性对照 Histone H3 Antibody 可识别许多不同物种中高度保守的组蛋白 H3，包括人、小鼠、大鼠和猴。用于人和小鼠阳性对照 RPL30 基因座的引物组也包括在内，但该试剂盒用于检测其他物种时需要设计额外的对照引物组。
Copyright © 2016-2025 汇佰生物科技（深圳）有限公司 版权所有 保留一切权利 备案号 粤ICP备2022123097号-1 
粤公网安备 44031102000815号
