商品名称:SimpleChIP® Plus Enzymatic Chromatin IP Kit (Agarose Beads)
产品描述
SimpleChIP ® Plus 酶促染色质 IP 试剂盒(琼脂糖珠)#9004 包含对细胞或组织样品进行多达 30 次染色质免疫沉淀所需的缓冲液和试剂,并针对每次免疫沉淀 4 X 10 6 个细胞或 25 mg 组织进行了优化。完整的测定只需两天即可完成,并且可以轻松扩大或缩小规模以用于更多或更少的细胞或组织样本。
将细胞或组织用甲醛固定并裂解,用微球菌核酸酶部分消化染色质片段化,获得1至5个核小体的染色质片段。染色质的酶促断裂比超声处理温和得多,并且消除了超声处理过程中超声处理功率变化和染色质乳化所导致的问题,这些问题可能导致染色质断裂不完全或由于蛋白质变性和降解而导致抗体表位丢失。使用经过 ChIP 验证的抗体和 ChIP 级蛋白 G 琼脂糖珠进行染色质免疫沉淀。逆转蛋白质-DNA 交联后,使用 DNA 纯化旋转柱纯化 DNA,无需苯酚/氯仿提取和乙醇沉淀即可轻松高效地回收 DNA 并去除蛋白质污染物。免疫沉淀过程中特定 DNA 序列的富集可以通过多种方法进行分析,包括标准 PCR 和定量实时 PCR。请注意,该试剂盒与 ChIP-seq 不兼容,因为 ChIP 级 Protein G 琼脂糖珠会被超声处理的鲑鱼精子 DNA 封闭,从而干扰下游测序。
SimpleChIP ® Plus 试剂盒还提供重要的对照,以确保 ChIP 实验成功。该试剂盒包含阳性对照组蛋白 H3 抗体、阴性对照正常兔 IgG 抗体以及用于 PCR 检测人和小鼠核糖体蛋白 L30 (RPL30) 基因的引物组。组蛋白 H3 是染色质的核心成分,与整个基因组的大多数 DNA 序列结合,包括 RPL30 位点。因此,Histone H3 Antibody 提供了一种通用的阳性对照,可以丰富几乎所有检查的位点。